neCTC-BC-试剂盒
非依赖EpCAM 表达的乳腺癌循环肿瘤细胞分离技术
将目前成熟的CellCelector™单细胞分离技术与我们最新研发的CTC分离试剂盒联用，可实现从液体活检中优化分离到100%纯度的乳腺癌细胞
从病人样本复杂的细胞群中高精度分离（稀有的）单个循环肿瘤细胞（CTC）的技术现已具备。然而，大多数基于抗体的分离手段，其靶向为表达上皮细胞粘附分子（EpCAM）的CTCs。这种方法忽略了EpCAM低表达或阴性的细胞，这些细胞可能代表了上皮间充质转化（EMT）产生的CTC亚群。已发表的大量数据表明，EMT可能有助于肿瘤耐药1,2,3，也可能与肿瘤细胞的干细胞有关4,5。
1Fischer KR, Durrans A, Lee S, et al. Epithelial-to-mesenchymal transition is not required for lung metastasis but contributes to chemoresistance. Nature. 2015;527:472–476.
2Zhuo W, Wang Y, Zhuo X, et al. Knockdown of Snail, a novel zinc finger transcription factor, via RNA interference increases A549 cell sensitivity to cisplatin via JNK/mitochondrial pathway. Lung Cancer. 2008;62:8–14.
3Zheng X, Carstens JL, Kim J, et al. Epithelial-to-mesenchymal transition is dispensable for metastasis but induces chemoresistance in pancreatic cancer. Nature. 2015;527:525–530.
4Mani SA, Guo W, Liao MJ, et al. The epithelial-mesenchymal transition generates cells with properties of stem cells. Cell. 2008;133:704–715.
5Liu S, Cong Y, Wang D, et al. Breast cancer stem cells transition between epithelial and mesenchymal states reflective of their normal counterparts. Stem Cell Reports. 2014;2:78–91.
我们最新推出的neCTC-BC-试剂盒 联合 ALS CellCelector™ 全自动单细胞筛选捕获系统，为您提供了一种可靠的分离收集包含所有EpCAM表达水平的乳腺癌CTC方法。无论在您自己的实验室，还是通过我们最先进的细胞和分子生物学实验室合作伙伴提供的服务，neCTC-BC-试剂盒都是最佳的选择。
neCTC-BC-试剂盒 是基于磁珠+铁磁流体，利用两种针对细胞表面蛋白的抗体的组合。其性能已在我们的合作伙伴实验室进行了可靠的测试和验证，并显示出以下关键优势：
1) 抗体混合物可捕获EpCAM阳性和EpCAM阴性肿瘤细胞
图1显示neCTC-BC-试剂盒中使用的两种抗体可以结合EpCAM阳性（T47d，Sk-Br-3，MCF-7）和EpCAM阴性（MDA-MB-231）肿瘤细胞。
Fig.1: The selected antibodies detect both EpCAM-positive and EpCAM-negative breast cancer cell lines
Fig. 2: The selected antibodies in combination detect synergistically more CTCs than used as single capture reagent
2) 这两种抗体协同作用捕获肿瘤细胞
neCTC-BC-试剂盒 对乳腺癌患者的血液样本的表现非常重要。为此，用3名乳腺癌患者的7.5毫升外周血对试剂盒进行了测试。两种抗体各自都可以捕获到CTCs，但如果同时使用这两种抗体，CTC细胞收集率会显著增加。抗体的组合具有相互促进作用。
3) 富集的CTCs在EpCAM表达方面表现出广谱性
该实验验证了neCTC-BC-试剂盒 对EpCAM阳性和EpCAM阴性CTCs的有效性。 图3描述了使用neCTC-BC-试剂盒检测到从EpCAM表达“阴性”到“高”表达的全范围覆盖的CTC。
Fig.3: The selected antibodies in combination detect CTCs with a broad continuum of EpCAM-expression
Fig. 4: The selected antibodies in combination detect CTCs, verified by low pass sequening
4) 利用低深度测序可以证明富集的细胞是肿瘤细胞。
使用ALS CellCelector™ 分离单个CTCs并进行基因扩增，通过低深度基因组DNA测序。
图4显示了基因组DNA的畸变，提供了这些细胞来源于乳腺癌的证据。
总结
neCTC-BC-试剂盒 能够协同作用，检测和捕获具有广泛EpCAM表达水平的乳腺癌患者血液中的CTCs，并且能够从同一患者的血液样本中分离和分析具有不同EpCAM表达水平的CTCs。
neCTC-BC-试剂盒 可利用各种磁珠或铁磁流体，使其能够用于利用手持磁铁或自动CTC分离捕获系统的相关应用。抗体将作为单独的混合物提供，以便直接和间接捕获细胞。为了验证捕获效率，可提供具有EpCAM阳性和EpCAM阴性乳腺癌细胞系的确切数目的可选质控样品。
有了neCTC-BC-试剂盒，你现在就可以从乳腺癌样本中分离出CTC，而不需要昂贵的设备，而且不依赖于它们的EpCAM表达水平。只需使用一个手持式磁铁，你就可以富集你的样品到一个点，他们已经准备好通过显微操作系统被净化。这可以手动完成或使用我们的ALS CellCelector™ 技术完全自动完成。
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